熒光顯微鏡中各濾色片的作用 - 分析行業(yè)新聞
日期:2023-01-28 16:07 瀏覽次數(shù):101
熒光顯微鏡*關(guān)鍵的問(wèn)題是濾光片的組合,激發(fā)濾光片與屏蔽濾片都必須適合于被觀(guān)察的熒光體并相互匹配。對(duì)一些特定用途,選擇濾光片若有錯(cuò)誤,有可能產(chǎn)生誤解,甚至錯(cuò)誤的結(jié)果。熒光顯微技術(shù)的成就和高質(zhì)量濾光片及巧妙配用濾光片組是不可分隔的,熒光顯微鏡的濾光片種類(lèi)有以下幾種。
1、吸熱濾光片
吸熱濾光片是防止光源光譜中的熱輻射線(xiàn)損傷光具組所必需的濾光片。較早的**顯微鏡配備有可裝蒸餾水的鼓形瓶充當(dāng)吸熱裝置,現(xiàn)代各類(lèi)大型研究用的顯微鏡在光源燈箱或叫燈室中都裝有玻璃吸熱濾光片,這是一種透明的微帶黃色的玻璃片,Leitz公司的KG1 (2 mm)、BG38(4 mm)濾光片能夠通透近乎所有紫外光和可視光光譜,是通光量可達(dá)98%的濾光片。它只選擇性吸收紅外光熱輻射線(xiàn)。
2、激發(fā)濾光片
激發(fā)濾光片可以選擇性吸收長(zhǎng)波譜線(xiàn)而只通透紫外線(xiàn),紫色、藍(lán)色和綠色光線(xiàn)的濾光片為激發(fā)濾光片。Zeiss公司、Reichert公司、Olympus公司的B系列、G系列、BG系列, Shott公司的UG系列,Opton公司的H、G、BP系列,Leitz公司的BP系列等濾光片均屬激發(fā)濾光片。
3、阻擋濾光片
阻擋濾光片是選擇性吸收短波譜線(xiàn)和紅外線(xiàn)而通透較長(zhǎng)波可視線(xiàn)的濾光片,其功能是使觀(guān)察者能夠看到被檢物體所激發(fā)出來(lái)的熒光,同時(shí)保護(hù)觀(guān)察者的角膜免遭紫外線(xiàn)傷害。
4、色光分離濾光片
色光分離濾光片是將激發(fā)光反射到被檢物體上,使被檢物體激發(fā)出熒光,再將熒光透射到目鏡的濾光反射鏡。這類(lèi)濾光片只能用于落射光聚光器中,而透射光熒光顯微鏡不需要色光分離。
5、干涉濾光片
干涉濾光片是高性能激發(fā)濾光片的一種。它是將數(shù)張薄層金屬膜疊放在拋光的兩張玻璃片之間制成的濾光片。每張薄金屬膜的折光系數(shù)都不相同,因此照明光源的各種不同波長(zhǎng)的譜線(xiàn)在每張金屬薄膜上反復(fù)進(jìn)行反射,使得某些波長(zhǎng)的譜線(xiàn)因相消干涉而抵消,另一些波長(zhǎng)的譜線(xiàn)相加干涉而得以加強(qiáng),并透射過(guò)去,這樣得到透射波譜很窄、半波峰寬度只有6~20nm.透光度可達(dá)到60%~70%的濾光片。

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